Ngày cập nhật 13 Tháng Mười Hai 2019
Đậu tương là loại hạt biến đổi gen (GM) quan trọng nhất trên toàn thế giới. Các quy định liên quan đến phê duyệt các giống đậu tương công nghệ sinh học và ghi nhãn sản phẩm đòi hỏi kỹ thuật phát hiện chính xác và đáng tin cậy để sàng lọc đậu nành GM. DNA chiết xuất chất lượng cao là điều cần thiết cho các phương pháp giám sát dựa trên DNA. Do đó, bốn giao thức được sử dụng rộng rãi (SDS, CTAB, DP305 và DNeasy Plant Mini Kit) đã được so sánh trong nghiên cứu hiện tại để khám phá phương pháp trích xuất DNA hiệu quả nhất cho ma trận đậu nành thô.
Phương pháp dựa trên SDS cho thấy khả năng ứng dụng cao nhất. Sau đó, các yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến năng suất và độ tinh khiết của DNA, như nồng độ thành phần đệm ly giải SDS và các hợp chất hữu cơ được sử dụng để phân lập DNA, đã được nghiên cứu thêm để cải thiện DNA thu được từ hạt đậu nành thô, điều này cho sự đổi mới của công việc này. Kết quả là, dung dịch đệm ly giải (2% SDS (w / v), 150 mM NaCl, 50 mM Tris / HCl, 50 mM EDTA, pH 8.0) và các thuốc thử hữu cơ bao gồm chloroform / isoamyl alcohol (24: 1, v / v) (C: I), isopropanol và ethanol tương ứng với quy trình chiết xuất và kết tủa thứ nhất và thứ hai, tương ứng, được sử dụng trong phương pháp SDS được tối ưu hóa. Phương pháp tối ưu hóa đã được xác minh bằng cách chiết xuất khoảng 2020–2444 ng DNA / mg đậu tương với tỷ lệ A260 / 280 của 1.862 – 1.954 từ năm giống đậu tương công nghệ sinh học và không công nghệ sinh học. Chỉ cần 0,5 mg đậu nành để có đủ DNA để khuếch đại PCR bằng phương pháp dựa trên SDS được tối ưu hóa. Những kết quả này chỉ ra rằng giao thức sàng lọc trong nghiên cứu hiện tại đạt được sự phù hợp và hiệu quả cao nhất để phân lập DNA từ bột hạt đậu nành thô.
Nguồn: ncbi.nlm.nih.gov
