Ngày cập nhật 13 Tháng Mười Một 2019
Sửa đổi gen là một công cụ đầy hứa hẹn để nhân giống cây trồng và ứng dụng dần dần từ phòng thí nghiệm vào hiện trường. Các gen đánh dấu có thể lựa chọn (SMG) được yêu cầu trong quá trình biến đổi để đơn giản hóa việc xác định cây chuyển gen; tuy nhiên, mong muốn có được cây chuyển gen mà không cần đánh dấu lựa chọn.
Sự tích hợp gen chuyển qua trung gian của các hệ thống tái tổ hợp đặc trưng (SSR) vào các vị trí gen được dành riêng đã được chứng minh ở một vài loài thực vật khác nhau. Ở đây, một hệ thống vectơ tự động loại bỏ sử dụng Cre cảm ứng nhiệt để loại bỏ điểm đánh dấu có thể lựa chọn từ ngô chuyển gen, mà không cần phải chuyển đổi lặp lại hoặc lai chéo. Vectơ kết hợp một recombinase đặc trưng cho trang web (hsp70 :: Cre) cho phép loại bỏ chính xác gen đánh dấu có thể lựa chọn. Gen đánh dấu chỉ thị này được sử dụng để lựa chọn mô dương tính ban đầu. Egfp cũng có chức năng như một điểm đánh dấu trực quan để chứng minh tính hiệu quả của Cre cảm ứng nhiệt. Một gen đánh dấu thứ hai cho sắc tố anthocyanin (Rsc) nằm bên ngoài vùng bị loại bỏ bởi Cre và được sử dụng để xác định chuyển gen ở các thế hệ tương lai.
Sử dụng vectơ cắt bỏ tự động cảm ứng nhiệt, cây ngô biến đổi gen không có dấu được thu được trong một quá trình chỉnh sửa gen được kiểm soát chính xác. Các phân tích di truyền và phân tử chỉ ra rằng hệ thống tự động cắt bỏ cảm ứng được kiểm soát chặt chẽ, với sự cắt bỏ DNA hiệu quả cao và cung cấp một phương pháp có độ tin cậy cao để tạo ra ngô chuyển gen.
Nguồn: ncbi.nlm.nih.gov